Среда Кнудсона

Прошу учитывать, что работаю с технологическим оборудованием. Если надо насыщать раствор воздухом, могу поставить колбу под наклоном, на выражающуюся платформу, будет постоянное перемешивание. Концентрация солей в жидкости, без загустителя какая должна быть, для проращивания семян и какая для роста сеянцев в питательной с загустителем? Высевать проростки только на поверхность, заглублять нельзя?

А фото. Только плесень выросла и все?

Значит опыт не удался?
Мне тоже скоро предстоит эксперементировать...
Ох не легкая это работа, сажать орхидеи из плода.
Люди! Напишите свои результаты, кто во что пробовал сеять и каков результат???
Ведь не 3 человека пробовали...Может выведем свою среду    

[QUOTE]Suvi пишет:
Ну, что, уже могу рассказать, что у меня получилось:) Шикарная плесень выросла из моей брассавольной коробочки:)
Вычитала в книге Михеева, что семена из раскрывшейся коробочки обратно стерилизуются раствором хлорной извести, 10 гр. на 140 мл.
Не поленилась сходить в садик, выклянчить ложку хлорки:) Как папа Карла выуживала так называемые семена после купания:)
QUOTE]
если семена очень мелкие - как раз не нужно их стерилизовать в открытом виде, возьмите тонкую тряпочку чистую - любую - размер 5Х5 сммаксимум, положите в серединку семена, краешки заверните так, чтобы получился квадратик в итоге примерно 1.5х1.5 см, когда вы намочите его при стерилизации, мокрая ткань не будет раскрываться, при посеве отогнете краешки пинцетом стерильным.
как завести стерильную культуру - http://bio-technology.nm.ru/steril.htm, без агара можно обойтись, думаю, для орхидей еще и лучше просто жидкая среда, - на дно пробирок или баночек комочек ваты (рыхлый), сверху - вырезанный по диаметру сосуда кусочек фильтровальной бумаги, залить жидкой питательной средой так, чтобы ее уровень не превышал 1 мм над поверхностью бумаги. Высота столбика среды в пробирке диаметром 2 см - примерно 1-1,5 см, в баночке из под детского питания - 0,5 см (стерилизуется так же, как и обычная среда с агаром после того, как конструкция собрана, после стерилизации баночки со средой должны выстояться при комнатной температуре минимум неделю), как посеять - http://bio-technology.nm.ru/rastexpl.htm,  как работать без ламинара - http://bio-technology.nm.ru/work.htm. Когда посеете, оберните краешки фольги пишевой пленкой, прижав их к банке, чтобы крышка не елозила, так надежнее. Все получится.

a34- в жидкой среде совсем другие условия, абсолютно. Можете не пытаться экспериментировать, ничего путного не выйдет.  

Глеб, я имела в виду - после стерилизации среды - до посева - подождать неделю, чтобы увидеть, растет посторонняя микрофлора или нет. А насчет жидкой среды - неправда ваша. Условия в данном случае будут такие же, как и на поверхности агаризованной. Я же не предлагаю В среде жидкой культивировать - там нужно перемешиваение, есесс-но, я предлагаю НА плотике из фильровашки, там идет нормальный газообмен, поскольку эксплант в воздухе, а питательная среда идет через фильровашку.  Мы правда так культивировали. Начинали в экспериментах по осмоустойчивости (среда при высоких концентрациях осмотике не застывала, пришлось изгаляться) - увидели, что каллусы растут даже лучше порой, чем на среде с агаром. А потом стали микроразмножение роз так проводить - там траблы были с тем, что фенолы из среза диффундируют в питательную среду и приходится то среду менять часто при введении в культуру, то добавлять активированный уголь, который жрет пит.в-ва. С мостиками же был просто блеск - поскольку не было такой высокой концентрации фенолов именно в месте, где лежал эксплант - диффузия в жидкой среде сильнее. Просто нужно следить за тем, чтобы питательная среда не был выше мостика, допустимый максимум - 1 мм, грубо говоря.

На фильтровашке, да, нормально. Я думал речь именно про жидкость. Так можно получить суспензионную культуру клеток, но это совсем из другой оперы.

Концентрация солей суммарная - около 5г/литр, сахара - от 10 до 30, я 20 делаю.

Всем привет!
Вот решила поднять тему и сказать спасибо всем участникам дискуссии, Глебу в частности!
Сбылась мечта идиота! Семена орхидей проросли!
Уж очень хотелось попробовать самой опылить и посеять семена, чтобы понаблюдать за процессом развития и роста. Такая мистика, из крошечной пылинки образуется растение!
Вот, на сегодняшний день, мы выглядем так:

Марина! Как здорово! Вы умница!  
А кто там у Вас?